friend or foe?

Diploma thesis - University of Veterinary Medicine Vienna - 2021

In this diploma thesis, we focused on clonality testing in the diagnostic work-up of feline chronic enteropathy and asked whether it can be seen as a suitable stand-alone method. The two most common feline gastrointestinal diseases are the lymphoplasmacytic enteropathy and the alimentary small cell lymphoma. Clonality testing enables us to detect clonal B- or T-lymphocyte populations that originate from a single neoplastic B- or T-cell. In this retrospective study, we analysed the CDR3 repertoire of the B- and T-cell receptors. Therefore, formalin-fixed, paraffin-embedded (FFPE) samples from the small intestine of 34 cats were selected. They all had in common a histopathological report of mild or moderate lymphoplasmacytic intestinal infiltration. After genomic DNA extraction and further PCR suitability tests, the feline patient samples were assayed by clonality testing, together with immunohistochemistry and histopathological examination. In 23 out of 34 cases clonal results occurred, of which 19 showed a monoclonal pattern. As in a lymphocytic-plasmacytic inflammation, the infiltration is usually confined to the Lamina propria mucosae and in lymphoma, the cells often infiltrate beyond the mucosa. Therefore, the additional mild to moderate lymphoplasmacytic infiltration of the Tela submucosa was assessed to find out whether this suggests early lymphoma and thus explain the high number of monoclonal clonality results. Based on histopathology and immunohistochemistry, four layer-associated categories were established. The obtained clonality results were discussed as compared with the following categories: Mild and moderate lymphoplasmacytic infiltration of the Lamina propria mucosae, mild and moderate lymphoplasmacytic infiltration of the Lamina propria mucosae and Tela submucosa. This study underlines that clonality testing can be used as an adjunct diagnostic approach in feline patients with chronic enteropathy. However, this technique is far from being a stand-alone tool and the obtained results have to be interpreted in the context with the patient’s history, clinical status and histopathological examination.

Diplomarbeit - Veterinärmedizinische Universität Wien - 2021

In dieser Diplomarbeit gingen wir unter anderem der Frage nach, ob bei der Aufarbeitung von chronischen Darmerkrankungen bei der Katze die Klonalitätsprüfung eine geeignete alleinstehende diagnostische Methode darstellt. Die beiden häufigsten gastrointestinalen Erkrankungen bei der Katze sind einerseits die entzündliche Darmerkrankung („inflammatory bowel disease“, IBD) und andererseits das alimentäre Lymphom. Mittels Klonalitätsprüfung, einer PCR-basierten Methode, kann zwischen einer klonalen und einer heterogenen Lymphozytenpopulation unterschieden werden. Letzteres spricht eher für einen entzündlichen Prozess, während ersteres lymphomverdächtig ist. In dieser retrospektiven Studie wurde das CDR3-Repertoire der B- und T-Zell-Rezeptoren mittels PCR analysiert. Hierfür wurden 34 in Formalin-fixierte und Paraffin-eingebettete Dünndarmproben von Katzen mit dem histopathologischen Befund „gering- oder mittelgradige lymphoplasmazelluläre Infiltration untersucht. Nach der DNA-Extraktion wurden Untersuchungen zur PCR-Tauglichkeit der Proben und anschließend die eigentliche Klonalitätsprüfung durchgeführt. Des Weiteren wurden eine erneute histopathologische sowie eine immunhistochemische Untersuchung durchgeführt. Innerhalb der untersuchten Kohorte fanden wir in 23 der 34 Fälle ein klonales Ergebnis, wobei 19 Proben ein monoklonales Muster zeigten. Lymphoplasmazelluläre Entzündungen sind in der Regel auf die Lamina propria mucosae beschränkt. Lymphome, hingegen, können über die Tunica mucosa hinaus infiltrieren. Daher wurde weitergehend untersucht, ob eine Ausdehnung der gering- bis mittelgradigen lymphozytären Infiltration auf die Tela submucosa, ein Hinweis auf ein beginnendes Lymphom und damit eine Erklärung für die hohe Anzahl an klonalen Ergebnissen sein könnte. Anhand der histopathologischen Befunde wurden vier, die Darmschichten betreffende, Gruppen definiert, mithilfe derer die Ergebnisse der Klonalitätsprüfung dargestellt und diskutiert wurden (gering- und mittelgradige lymphoplasmazelluläre Infiltration der Lamina propria mucosase sowie gering- und mittelgradige lymphoplasmazelluläre Infiltration der Lamina propria mucosae und der Tela submucosa). Eine schlüssige Aussage konnte jedoch nicht gefunden werden. Zusammenfassend lässt sich sagen, dass die Klonalitätsprüfung eine mögliche Methode in der Diagnostik von chronischen, felinen Darmerkrankungen ist, jedoch nicht als alleinstehender Test verwendet werden kann. Die Ergebnisse müssen immer in Kombination mit dem klinischen Zustand des Tieres, der Krankengeschichte und der histopathologischen Untersuchung interpretiert werden.

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40 Blätter