Titel (eng)

Influence of protein source in culture media for IVM, IVF and embryo culture on the development of domestic cat oocytes

Autor*in

Larissa Bartsch

Betreuer*in

Auke Boersma

Jennifer Zahmel

Begutachter*in

Sabine Schäfer-Somi

Beschreibung (eng)

Bachelor thesis - University of Veterinary Medicine Vienna - 2021

Beschreibung (eng)

Assisted reproduction techniques and cryopreservation of gametes have become an important part of wildlife research and conservation. By understanding reproductive traits and strategies, breeding programs in zoos can be supported and genetic variability in wildlife populations can be maintained. In order to understand basic aspects of assisted reproduction of endangered feline species, in vitro fertilisation of the domestic cat can be studied, where the continuous improvement of in vitro culture conditions is essential. The aim of this work was to find an alternative to the human culture medium SAGE Art-1529, which has been successfully applied in the IVF-culture of domestic cats but is not commercially available in Europe. In another experiment, the Serum Substitute Supplement (SSS) was compared to the previously used fetal calf serum (FCS) as a protein source in embryo culture. Division rates and development speed of the embryos were recorded with the time-lapse system Primo Vision. SAGE Art-1029 supplemented with SSS was found to have no significant differences to SAGE Art-1529 regarding maturation rate, cleavage rate, morula rate and blastocyst rate. The timing of cleavage division showed no significant differences at the 4-cell stage, morula stage and blastocyst stage, however embryos in SAGE Art-1029 developed significantly slower to 8-cell stage. Though there were individual differences during embryo growth, there were no differences in the overall outcome regarding blastocyst rate, which therefore does not make SAGE Art-1029 perform worse overall, but makes it a viable alternative to SAGE Art-1529. SSS in embryo culture was found to have no significant differences to FCS regarding maturation rate, cleavage rate, morula rate and blastocyst rate. The timing of cleavage division showed no significant differences at the 4-cell stage and blastocyst stage, however embryos in SSS developed significantly slower to 8-cell stage and morula stage. Further studies could analyse whether the speed of embryo development at certain division rates effects not only the blastocyst rate but also the success of embryo transfers in domestic cats and whether predictions could be made for each embryo at an early embryonic stage in the future, and how SSS affects this outcome. For the application tested here, SSS seems to be an alternative to FCS in embryo culture in our laboratory.

Beschreibung (deu)

Bachelorarbeit - Veterinärmedizinische Universität Wien - 2021

Beschreibung (deu)

Assistierte Reproduktionstechniken und die Kryokonservierung von Gameten sind ein wichtiger Bestandteil der Wildtierforschung und -erhaltung geworden, um Zuchtprogramme in Zoos zu unterstützen und die genetische Vielfalt von Wildtierpopulationen zu erhalten. Um die grundlegenden Aspekte der assistierten Reproduktion von gefährdeten Katzenarten zu verstehen, kann die In-vitro-Fertilisation der Hauskatze untersucht werden, wobei eine kontinuierliche Verbesserung der In-vitro-Kulturbedingungen von entscheidender Bedeutung ist. Ziel dieser Arbeit war es, eine Alternative zu dem bei der Hauskatze bewährten, aber in Europa nicht kommerziell vertriebenen humanen Kulturmedium SAGE Art-1529 zu finden. In einem weiteren Experiment wurde das Serum Substitute Supplement (SSS) gegen das bisher verwendetet fetale Kälberserum (FCS) als Proteinquelle in der Embryonenkultur verglichen. Teilungsraten sowie Entwicklungsgeschwindigkeit der Embryonen wurden mit dem Zeitraffersystem Primo Vision erfasst. SAGE Art-1029, angereichert mit SSS, zeigte keine signifikanten Unterschiede zu SAGE Art- 1529 hinsichtlich der Reifungsrate, Spaltungsrate, Morularate und Blastozystenrate. Die Embryonalteilungen zeigte keine signifikanten Unterschiede im 4-Zell-Stadium, Morulastadium und Blastozystenstadium, außer im 8-Zell-Stadium. Obwohl es individuelle Unterschiede während des Embryowachstums gab, zeigten sich keine Unterschiede im Gesamtergebnis hinsichtlich der Blastozystenrate, was SAGE Art-1029 daher insgesamt nicht schlechter abschneiden ließ, sondern es zu einer Alternative zu SAGE Art-1529 macht. SSS in der Embryokultur zeigte keine signifikanten Unterschiede zu FCS hinsichtlich der Reifungsrate, Spaltungsrate, Morularate und Blastozystenrate. Die Embryonalteilungen zeigte keine signifikanten Unterschiede im 4-Zell-Stadium und im Blastozystenstadium, jedoch entwickelten sich die Embryonen in SSS signifikant langsamer bis zum 8-Zell-Stadium und zum Morulastadium. In weiteren Studien könnte untersucht werden, ob sich die Geschwindigkeit der Embryonalentwicklung zusätzlich auf Embryonentransfers auswirkt und ob in Zukunft Vorhersagen für jeden Embryo zu einem frühen Zeitpunkt gemacht werden können, und wie SSS dieses Ergebnis beeinflusst. Für die hier getestete Anwendung scheint SSS eine Alternative zu FCS in der Embryokultur in unserem Labor zu sein.

Sprache des Objekts

Englisch

Datum

2021

Rechte

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