Diplomarbeit - Veterinärmedizinische Universität Wien - 2022

Bei Schweinen und Wildschweinen sind drei Typen von porcinen Lymphotropen Herpesviren bekannt: PLHV-1, -2 und -3. Bis jetzt gibt es nur wenige Studien über deren Verbreitung und Pathogenität. Im Rahmen dieser Diplomarbeit wurden drei absolut quantifizierende Nachweismethoden (qPCRs) etabliert und das Vorkommen und die Viruslast von PLHV-1, -2 und -3 in einem österreichischen Wildschweinbestand bestimmt. Als erster Schritt wurden mit konventioneller PCR Genomfragmente von PLHV 1-3 erzeugt und kloniert, die als Positivkontrollen und Standards zur Validierung dienten. Mit der validierten qPCR wurden 45 Wildschweinproben auf PLHV-1, -2 und -3 getestet und die Viruslast wurde bestimmt. Es stellte sich heraus, dass PLHV-2 am häufigsten nachgewiesen werden konnte (75,6 %), gefolgt von PLHV-3 (60 %) und PLHV-1 (15,6 %). Auch Doppel- und Dreifachinfektionen konnten nachgewiesen werden. Die häufigsten Doppelinfektionen gab es bei der Kombination von PLHV-2 und PLHV-3 (51,1 %). Bei drei Tieren gab es eine Dreifachinfektion und nur bei drei der getesteten Tiere konnte keines der Viren nachgewiesen werden (jeweils 6,7 %). Die Viruslast lag bei allen Viren zwischen 100 und 1000000 GE/ml Tupfer- und Gewebelysat. Zusammenfassend, zeigen diese Ergebnisse, dass die porzinen Lymphotropen Herpesviren 1-3 in burgenländischen Wildschweinen sehr weit verbreitet sind. Zur zukünftigen Ermittlung der Prävalenzen von PLHVs in Hausschweinbeständen steht nun eine sensitive und spezifische Methode zur Verfügung.

Three types of porcine lymphotropic herpesviruses in feral and domestic pigs: PLHV-1, -2 and -3 are known. Until now, there are only a few studies about their distribution and pathogenicity in Austria. Within this diploma thesis, quantifying detection methods (qPCRs) were established and the occurrence and the virus load of PLHV-1, -2 und -3 in a feral pig population from the federal state “Burgenland” was determined. As first step for validation of the qPCR genomic fragments of the gB gene were amplified by conventional PCR and cloned into a plasmid. The cloned fragments served as positive controls as well as standards for the validation of the qPCR. The qPCR for PLHV 1 and 2 proved very sensitive and specific while PLHV 3 was 10fold less sensitive. The methods were applied to 45 samples of feral pigs and the virus loads of PLHV-1, -2 und -3 were determined. PLHV-2 turned out to be the most common (75.6 %), followed by PLHV-3 (60 %) and PLHV-1 (15.6 %). The most common double infection was the combination of PLHV-2 and PLHV-3 (51.1 %). Three animals had a triple infection and only in three of all tested animals was not detected any of the viruses (6.7 %). The virus load of all of the three viruses was between 100 and 1000000 GE/ml swab- and tissue-lysate. Overall, this results show that the porcine lymphotropic herpesviruses 1-3 are widely distributed in feral pigs in Burgenland (Austria). For further prevalence determination of the PLHVs in domestic pig populations is now a sensitive and specific method available.

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