Diplomarbeit - Veterinärmedizinische Universität Wien - 2023

Das Akute Bienenparalyse Virus hat vielfältige negative Einflüsse auf die Gesundheit von Bienenvölkern. Forschung an dieser Krankheit und weiteren Faktoren, die im Zusammenhang mit dem sogenannten „colony collaps disorder“ stehen, ist in Zeiten, in denen die Bienensterblichkeit ein geradezu dramatisches Ausmaß angenommen hat, von immenser Wichtigkeit. Das Wissen, welches durch Epitopkartierung erhoben wird, dient nicht nur der Grundlagenforschung, sondern kann auch in der Entwicklung von Schnelltests zur leichteren Feststellung von einem Befall mit dem besagten Virus oder neuen Therapieansätzen eingesetzt werden. In dieser Arbeit konnte über die Westernblot Methode gezeigt werden, dass das Strukturprotein VP3 von allen drei in dieser Arbeit untersuchten monoklonalen Antikörpern gebunden wird. Jedoch muss das vollständige Epitop noch erhoben werden. Durch Verkürzungs-PCRs konnte gezeigt werden, dass die letzte Aminosäure des Strukturproteins VP3 mit Sicherheit essenziell für die Antikörperbindung ist. Mögliche weiterführende Schritte wären beispielsweise die Verkürzungs-PCRs vom N-terminalen Ende der Sequenz durchzuführen oder den hinteren Teil des Strukturproteins VP3 in eine andere Sequenz hinein zu klonieren, um zu sehen ob die Antikörper die Sequenz immer noch erkennen können.

The Acute bee paralysis virus has various negative impacts on bee colony health. Investigating this disease and other factors contributing to the “colony collapse disorder” in times of immense bee losses is of utter interest. The knowledge gathered by epitope mapping, is not only serving as basic research but can enable other scientists to discover new ways to diagnose this disease via rapid tests or help develop new treatment plans. Within the framework of this thesis, it was possible to show via the Western blot method, that all three monoclonal antibodies investigated in this study bind to the structural protein VP3. By shortening the template VP3 it was possible to show with certainty, that the very last part, especially the last amino acid of VP3 is essential for the antibody-binding capability. Further investigations need to be conducted to confirm the complete epitope or if the epitope consists only of the last amino acid of structure protein VP3. Possible further steps are n-terminal shortening of template VP3 or cloning the c-terminal end into another sequence and testing if the antibodies are still able to detect a binding site.

Diploma thesis - University of Veterinary Medicine Vienna - 2024

50 Blätter