https://phaidra.vetmeduni.ac.at/o:4861 Funktionelle Charakterisierung equiner Enteroide in Hinblick auf die cAMP-abhängige Chloridsekretion Wienholz, Johanna Johanna Wienholz Pratscher, Barbara Barbara Pratscher Dengler, Franziska Franziska Dengler text deu Diplomarbeit - Veterinärmedizinische Universität Wien - 2024 Der Gastrointestinaltrakt des Pferdes ist ein komplexes Organsystem mit vielen Funktionen. Sein Epithel zeichnet sich dabei als wichtiges Organ für Transport und Barriere aus, das anfällig für unterschiedlichste Erkrankungen und Dysfunktionen ist. Um bei der Erforschung jener Erkrankungen und der physiologischen Funktionen des equinen Darmes zukünftig auf (lebende) Tiere verzichten zu können, werden Enteroide, die das Darmepithel in vitro simulieren, benötigt. Für diese Arbeit wurden Darmschleimhautproben von Jejunum und Colon gesunder Pferde extrahiert und mit dessen intestinalen Stammzellen equine Jejunum- und Colonenteroide (eqJE und eqCE) kultiviert. Um die Funktionen des Pferdedarmes in vitro darstellen zu können wurden die Enteroide mit dem zyklischen Adenosinmonophosphat (cAMP) - Agonisten Forskolin behandelt. Das Forskolin bewirkt eine Stimulation des Chloridkanals Cystic Fibrosis Transmembrane Conductance Regulator (CFTR) und führt daher zu einer vermehrten Chloridsekretion in das Lumen der Enteroide. Anhand der Umfangszunahme der einzelnen Enteroide konnte auf ein vermehrtes Wachstum, das im Vergleich mit der Kontrollgruppe bei eqJE signifikant war, geschlossen werden. Auch eqCE ist in der Lage zu sezernieren, jedoch nicht im selben Ausmaß wie eqJE. Dabei sind die sehr guten Anzucht- und Wachstumsbedingungen der Organoide zu berücksichtigen, die eine Größenzunahme aufgrund der Sekretion verschleiern könnte. Der Versuch hat gezeigt, dass sich Enteroide zur Erforschung des Intestinaltraktes des Pferdes eignen und künftig vermehrt für die Forschung am physiologischen Darm sowie an Erkrankungen eingesetzt werden sollten. Diploma thesis - University of Veterinary Medicine Vienna - 2024 The gastrointestinal tract of the horse is a complex organ system with many functions. Its epithelium serves as an important organ for transport and barrier functions and is susceptible to various diseases and dysfunctions. To avoid the use of (live) animals in future research on these diseases and the physiological functions of the equine intestine, enteroids that simulate the intestinal epithelium in vitro are needed. For this study, intestinal mucosa samples were extracted from the jejunum and colon of healthy horses and cultured with their intestinal stem cells to create equine jejunum and colon enteroids (eqJE and eqCE). To demonstrate the functions of the horse's intestine in vitro, the enteroids were treated with the cyclic adenosinmonophsphate (cAMP) agonist Forskolin. Forskolin stimulates the chloride channel Cystic Fibrosis Transmembrane Conductance Regulator (CFTR), leading to increased chloride secretion into the lumen of the enteroids. The increase in size of the individual enteroids indicates enhanced growth, which was significant for eqJE compared to the control group. Although eqCE is also capable of secretion, it does so to a lesser extent than eqJE. It is important to consider the very good growth conditions of the organoids, which may obscure size increases due to secretion. The experiment demonstrated that enteroids are suitable for studying the intestinal tract of horses and should be increasingly used in research on physiological gut functions and diseases in the future. http://rightsstatements.org/vocab/InC/1.0/ https://phaidra.vetmeduni.ac.at/api/object/o:4861/download 10.34876/4bsn-dd77 https://phaidra.vetmeduni.ac.at/o:2549 https://phaidra.vetmeduni.ac.at/o:72 application/pdf 1.50 MB 2024